pUC18载体作用是什么
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pUC18-TMV质粒载体是一个大肠杆菌表达载体,Tac强启动子可以驱动GST促溶标签和目的基因融合表达。
puc系列载体的工作原理
1、修剪因挑选凉爽,气温适宜的傍晚进行,避开雨天以及高温天气,以防修剪创口因高温或雨水感染细菌而腐烂。
2、修剪前戴上手套,以免双手触碰到光棍树汁液;准备好一把干净锋利的剪刀,使修剪创口干净利落。
3、根据自己的需求为光棍树修剪,一般剪去不好的、病变的枝条以及过高过长的枝条即可,使所有枝条都保持在差不多的高度即能保证植株的美观。
4、修剪之后将植株放在通风处静养,吹干修剪处的汁液,约一个晚上即可吹干,期间切记触碰修剪处。汁液干燥后可在修剪处涂抹少量多菌灵、百菌清溶液防止细菌感染,
5、正常养护即可,浇水时尽量避开修剪处,直至创口干瘪。
puc系列载体
把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术,送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具叫载体(Vector)。细菌质粒是重组DNA 技术中常用的载体。
质粒载体是在天然质粒的基础上为适应实验室操作而进行人工构建的。与天然质粒相比,质粒载体通常带有一个或一个以上的选择性标记基因(如抗生素抗性基因)和一个人工合成的含有多个限制性内切酶识别位点的多克隆位点序列,并去掉了大部分非必需序列,使分子量尽可能减少,以便于基因工程操作。
大多质粒载体带有一些多用途的辅助序列,这些用途包括通过组织化学方法肉眼鉴定重组克隆、产生用于序列测定的单链DNA、体外转录外源DNA序列、鉴定片段的插入方向、外源基因的大量表达等。
一个理想的克隆载体大致应有下列一些特性:
(1)分子量小、多拷贝、松弛控制型;
(2)具有多种常用的限制性内切酶的单切点;
(3)能插入较大的外源DNA片段;
(4)具有两个以上的遗传标记物,便于鉴定和筛选。
(5)对宿主细胞无害。常用的质粒载体大小一般在1kb至10kb之间,如PBR322、PUC系列、PGEM系列和pBluescript(简称pBS)等。
puc19载体
pMD19-T Vector是一种高效克隆PCR产物(TA Cloning)的.专用载体。本载体由pUC19载体改建而成,在pUC19载体的多克隆位点处的Xba I和Sal I识别位点之间插入了EcoR V识别位点,用EcoR V进行酶切反应后,再在两侧的3’端添加“T”而成。
因大部分耐热性DNA聚合酶进行PCR反应时都有在PCR 产物的3’末端添加一个“A”的特性,所以使用本制品可以大大提高PCR产物的连接、克隆效率。
由于本载体以pUC19载体为基础构建而成,所以它具有同pUC19载体相同的功能。
此外,本制品中的高效连接液Solution I可以在短时间内(约30分钟)完成连接反应,其连接液可以直接用于细菌转化,大大方便了实验操作。
本制品中的Control Insert(500 bp)还可以用于Control反应。本载体与pMD?18-T Vector 相比,本制品的 β-半乳糖苷酶的表达活性更高,菌落显示蓝色的时间缩短,菌落显示的蓝色更深。因此,克隆后更容易进行克隆体的蓝白筛选。
简而言之,就是一种可以将taq酶(注意:pfu不具备在产物两端加“A”碱基的能力)扩增的两端带有A碱基的产物连入这种载体,从而通过大肠杆菌扩增的载体,而且可以通过蓝白筛选来筛选阳性克隆,插入成功的为白,不成功为蓝。图谱可以去takara上下说明书。
puc18载体
pMD19-T Simple Vector的结构
pMD19-T Vector是一种高效克隆PCR产物(TA Cloning)的专用载体。本载体由pUC19载体改建而成,在pUC19载体的多克隆位点处的Xba I和Sal I识别位点之间插入了EcoR V识别位点,用EcoR V进行酶切反应后,再在两侧的3’端添加“T”而成。因大部分耐热性DNA聚合酶进行PCR反应时都有在PCR 产物的3’末端添加一个“A”的特性,所以使用本制品可以大大提高PCR产物的连接、克隆效率。
puc载体是什么载体
pMD19-T是一种高效克隆PCR产物的专用载体,以pUC19载体为基础构建而成,具有同pUC19载体相同的功能。pCMV-SPORT6是一种真核表达载体。
pucm-t载体
制冰机的尺寸大小因厂家品牌、制冰量及机型的不同而有所不同。一般而言,制冰机的尺寸一般以制冰量来衡量,而制冰量又分为每24小时制冰量。
小型制冰机的制冰量一般在20公斤以下,机身尺寸大约在40×50×60cm左右,较为适合家庭或者小型商铺的使用。
中型制冰机制冰量在20-200公斤之间,机身尺寸大约在70×70×110cm左右,适合中小型商铺、客栈等商业场所使用。
大型商用制冰机的制冰量在200公斤以上,机身尺寸一般在150×150×90cm左右,适合于大型饮食企业、食品加工厂和餐馆等需要大量制冰的场所使用。但具体的尺寸大小还需要参考具体的产品规格和需求来选择。
puc118载体
行书,是一种书法统称,分为行楷和行草两种。在楷书的基础上发展,是介于楷书、草书之间的一种字体,是为了弥补楷书的书写速度太慢和草书的难于辨认而产生的。"行"是"行走"的意思,因此它不像草书那样潦草,也不像楷书那样端正。
运载体的作用于什么键
质粒(Plasmid)是附加到细胞中的非细胞的染色体或核区DNA原有的能够自主复制的较小的DNA分子(即细胞附殖粒、又胞附殖粒)。大部分的质粒虽然都是环状构型,它存在于许多细菌以及酵母菌等生物中,乃至于植物的叶绿体和线粒体等胞器中。然而,1984年,在Streptomyces coelicoler(天蓝色链霉菌)等放线菌以及在Borrelia hermsii(赫氏蜱疏螺旋体)等原核生物中,又相继发现线形质粒。
天然质粒的DNA长度从数千碱基对至数十万碱基对都有。质粒天然存在于这些生物里面,有时候一个细胞里面可以同时有一种乃至于数种的质粒同时存在。质粒的套数(copy number)在细胞里从单一到数千都有可能。
有时有些质粒含有某种抗药基因(如大肠杆菌中就有含有抗四环素基因的质粒)。有一些质粒携带的基因则可以赋予细胞额外的生理代谢能力,乃至于在一些细菌中提高它的致病力。一般来说,质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性的作用。它是基因工程最常见的运载体。
运载体的本质是什么
运载体是基因工程中靶基因转入受体的环状DNA,其化学本质是蛋白质加脱氧核糖核酸。蛋白质的基本单位是氨基酸,脱氧核糖核酸的基本单位是磷酸、碱基和脱氧核糖!
运载体与载体的区别
化学本质是膜上的蛋白质,特点如下:
a、载体具有特异性,不同物质的载体不同,不同生物细胞膜上的载体的种类和数目也不同。
b、载体具有饱和现象,当细胞膜上的载体已经达到饱和,细胞吸收该载体运载的物质的速度不再随物质浓度的增大而增大。
运载体的功能
做为具有使用性的载体做为具有使用性的载体,一般最少有2个以上不同的限制性酶切位点,这样能够保证需要插入片段的效率和插入的片段插入的方向性。
如果只有一个酶切位点,那在做连接反应时候载体自连现象会非常严重,同时插入片段有可能以2种相反方向插入载体,这样连接成功后还需要筛选方向正确的连接体,这样筛选过于困难,没有实用性。
运载体是什么
大肠杆菌是细菌,细菌的增殖方式是分裂生殖。
但是细菌的细胞分裂与植物细胞和动物细胞的细胞分裂方式不同,细菌属于原核生物,植物细胞和动物细胞都是真核生物,它们的体细胞进行的是有丝分裂,而原核生物由原核细胞构成,原核细胞的分裂方式是二分裂。
二分裂的过程比有丝分裂要简单,是细胞核先伸长,然后从中间最窄的部分断裂,接着是细胞质的分裂,然后细胞一分为二。
运载体和表达载体的区别
一般标记基因的DNA序列是已知的,若选用抗氨苄青霉素基因,则可在目的基因导入后用氨苄青霉素来处理受体细胞,若无异常,则抗氨苄青霉素已合成,说明基因已得到表达。
标记基因的作用在于便于检测目的基因的情况。因为标记基因和目的基因同位于运载体上,要导入都导入,要表达则都会表达。
检测分三种,首先是通过对标记基因的检测,通常用DNA分子杂交技术,来检验标记基因是否成功的导入受体细胞。
或者用分子杂交技术,来看目的基因导入后是否成功转录出信使RNA。
最后可以用抗原-抗体检验,来验证导入基因是否成功表达。扩展资料标记基因就是在导入受体细胞时导入进取的人类的已知作用的基因,目的是为检测目的基因是否成功导入。由于一般都是有"鸟枪法"导入的目的基因,所以成功率并不是很高,目的基因的检测和筛选就显得很有必要。
例如:大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因,当这种质粒与外源DNA组合在一起形成重组质粒,并被转入受体细胞后,就可以根据受体是否吸饱具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得了目的基因。
当含有青霉素的培养基来培养受体细胞时,能够在培养基中存活下来的受体细胞就可以认为是成功的导入了外源DNA,标记基因就起作用了。
运载体的作用避免
二者不同。运载体主要在基因工程中使用,如质粒。运载体的主要作用是将目的基因整合到受体细胞中。细胞膜上载体蛋白一般运输小分子物质,协助扩散和主动运输都需要借助载体蛋白。
运载体的结构
无论是固体运载火箭还是液体运载火箭,无论是单级运载火箭还是多级运载火箭,其主要的组成部分均包括结构系统(又称箭体结构)、动力装置系统(又称推进系统)和控制系统,这三大系统称为运载火箭的主系统。
主系统的可靠与否,将直接影响运载火箭飞行的成败。
此外,运载火箭上还有一些不直接影响飞行成败并由箭上设备与地面设备共同组成的系统,例如遥测系统、外弹道测量系统、安全系统和瞄准系统等。
结构系统是运载火箭的基体,它用来维持火箭的外形,安装、连接火箭各系统内的所有仪器、设备,承受火箭在地面运输、发射操作和在飞行过程中箭上的各种载荷。
动力装置系统是产生推力,推动运载火箭飞行的装置。
对液体火箭来说,动力装置系统由推进剂输送、增压系统和液体火箭发动机两大部分组成。
固体火箭的动力装置系统较为简单,它的主要部分就是固体火箭发动机,推进剂直接装在发动机的燃烧室壳体内。
控制系统用来控制运载火箭沿预定弹道正常飞行。
控制系统由制导系统、姿态控制系统、电源供配电和时序控制系统三大部分组成。
制导系统的用途是控制运载火箭按预定的弹道运动,把有效载荷送到预定的空间位置。
姿态控制系统(又称姿态稳定系统)的功用是纠正运载火箭飞行过程中的俯仰、偏航、滚动误差,使之保持正确的飞行姿态。
电源供配电和时序控制系统则按预定飞行时序实施供配电控制。
遥测系统的功用是把火箭飞行中各系统的工作参数及环境参数测量出来,通过火箭上的无线电发射机将这些参数送回地面,由地面接收机接收;亦可将测量所得的参数记录在火箭搭载的磁记录器上,在地面回收磁记录器。
这些测量参数既可用来预报航天器入轨时的轨道参数,又可用来鉴定和改进运载火箭的性能。
一旦运载火箭在飞行中出现故障,这些参数就是故障分析的依据。
外弹道测量系统的功用是利用地面的光学、无线电设备与装在运载火箭上的对应装置一起对飞行中的运载火箭进行跟踪,并测量其飞行参数,用来预报航天器入轨时的轨道参数,也可用来作为鉴定制导系统精度和进行故障分析的依据。
安全系统的用途是当运载火箭在飞行中出现故障不能继续飞行时,将其在空中炸毁,避免运载火箭坠落过程中给地面造成灾难性的危害。
安全系统包括运载火箭上的自毁系统和地面的无线电安全系统两部分。
箭上的自毁系统由测量装置、计算机和爆炸装置(炸药筒)组成。
当运载火箭的飞行姿态、飞行速度超出允许的范围时,计算机会发出引爆爆炸装置的指令,使运载火箭在空中自毁。
无线电安全系统则是由地面雷达测量运载火箭的飞行轨道,当运载火箭的飞行超出预先设定的安全范围时,从地面发出引爆箭上爆炸装置的指令,由箭上的接收机接收后将火箭在空中炸毁。
瞄准系统的作用是在发射前对运载火箭进行初始方位定向。
瞄准系统由地面瞄准设备和运载火箭上的瞄准设备共同组成。
常用运载体有哪些
我们知道,火箭种目繁多,不可一一列举。在此,我们只重点介绍航天运载火箭的结构和组成,并且只以化学能火箭为主要介绍对象。
事实上,运载火箭主要包括动力系统、控制系统、壳体及结构系统、有效载荷系统四大部分。那么,它们都有什么功用呢?下面作一一介绍。
火箭发动机动力系统
火箭发动机是使火箭具有强大推力的动力系统。它包括主动力系统和其他辅助动力设备。如果从燃料形式不同来分,则有固体(推进剂)发动机、液体(推进剂)发动机、固液混合(推进剂)发动机。这里所说的推进剂只包括燃烧剂和氧化剂两部分。这三种推进剂的火箭发动机结构是不同的。
固体火箭发动机
固体火箭发动机通常由燃烧室、喷管和点火装置等组成。燃烧室是放置固体推进剂药柱的场所,燃烧室的后部连接喷管,喷管可以是一个,也可以是多个。而点火装置则是由电爆管、点火药和壳体结构组成,它实际上也是一个小型的固体发动机。点火装置按照不同的点火要求,可以安装在发动机的头部、药柱的中部或尾端。当发动机工作时,先通电使电爆管爆炸,引燃点火药,然后由点火药点燃存放在燃烧室内的药柱,药柱燃烧产生的燃气流通过喷管高速喷出而产生推力。
固体火箭发动机结构较简单,工作可靠,药柱可长期贮存于燃烧室内,但效能较低,工作时间短,不易多次启动,而推力大小、方向的调节也比较困难。
液体火箭发动机
液体火箭发动机一般由推力室、推进剂供应系统和发动机控制系统组成。
推力室是发动机中产生推力的那一部分,它由推进剂喷注器、燃烧室和喷管组成。对非自燃推进剂来说,还有点火装置,如火花塞等。推进剂由喷注器喷入燃烧室,经雾化、混合、燃烧,形成3000℃—4000℃的高温和几十兆帕的高压燃气,在喷管内迅速膨胀,以每秒数千米的速度高速喷出而产生推力。
而推进剂供应系统则是把液体推进剂从贮箱输送到推力室的系统,这就好比是人的心血管系统一样,构造十分复杂。它有挤压式和泵压式两种。对现代大型火箭来说,主要是泵压式(包括泵、涡轮、传动机构和涡轮启动系统等)。
推进剂是靠高速转动的涡轮泵送到推力室的。因此,涡轮泵常常被说成是火箭的心脏。而发动机要工作,必须先让涡轮泵转动起来,这就是涡轮启动系统的任务。涡轮启动系统就像是心脏起搏器一样。涡轮启动系统的种类很多,现以燃气发生器的启动装置为例,来说明推进剂供应系统的工作原理和过程。
燃气发生器是如何点火使推进剂燃烧的呢?工作过程是这样的:燃气发生器包括火药启动器和电爆管。电爆管通电后爆炸,引起火药爆炸,产生低温燃气,进而吹动涡轮叶片,涡轮带动泵旋转,转动起来的泵将推进剂的一部分送进燃气发生器,而另一部分则送进推力室。进入燃气发生器的推进剂燃烧生成高温高压燃气,驱动涡轮泵以更高的速度旋转,将大量的推进剂输送到推力室燃烧,进而产生推力。
而发动机控制系统的作用是控制发动机的启动、点火和关机(即熄火)等工作程序,控制推进剂的混合比例,控制推力的大小和方向等。
其工作程序控制由按事先设计好的程序打开和关闭发动机供应系统的阀门来完成。
而推进剂的混合比例和推力的大小,则通过发动机上特有的装置和方法来控制。
推力方向控制早期采用石墨做成的舵来进行。它安装在喷管的排气出口,像船舶的舵那样,通过改变喷气流的方向来调整推力方向。目前,一般采用摇摆发动机,即通过发动机的偏转来调整推力方向。石墨舵偏转和发动机的.摇摆,都是由火箭的控制系统发出命令,通过一个叫做液压伺服机构的装置来完成的。
固液混合火箭发动机
这种火箭发动机一般是由放置固体燃料(或氧化剂药柱)的燃料室、喷管和贮放液态氧化剂和燃烧剂的贮箱以及液体推进剂组分供应系统所组成。
当发动机工作时,可以是固态、液态推进剂组分相互接触时自燃点火,也可以像固体发动机那样安装一个火药点火器。液体推进剂组分的供应则用压缩气体或燃气涡轮泵来供应。
上述三种发动机,不论是哪种类型,要提高其性能,主要是提高发动机的喷气速度。因此,最重要的是选择高性能的推进剂。同时要优化发动机设计方案,在尽量减少发动机自重的同时,提高推进剂的比冲值(即能量效应)。
火箭飞行控制系统
火箭飞行控制系统是运载火箭的“智能”部分,好比是火箭的眼睛、大脑和手脚。通常它是由制导系统、姿态控制与电源配电组成的火箭飞行控制系统和设置在地面的测试检查及发射控制系统组成。
制导系统
制导系统由惯性平台和计算机组成,用于控制火箭发动机准时点火、关机和火箭各级的分离,使火箭能按预定轨道飞行和确保有效载荷的入轨精度。
姿态控制
姿态控制用于纠正火箭在飞行过程中的俯仰、偏航和滚动误差,保持火箭以正确的姿态飞行,并实施定向和防流星碰撞。在动力飞行段,姿态控制通过惯性平台速率陀螺—数字控制器—伺服机构连续控制方案来实现;而在惯性飞行段,姿控系统则通过装有小型单组元推进剂发动机的开关控制方案来实现。
电源配电系统
电源配电系统的作用,一是给控制系统的仪器仪表供电和配电;二是按火箭飞行的先后工作程序发出时间顺序的命令;三是控制火箭工作状态的变化。
火箭测控系统
火箭的制导控制和姿态控制等是由测控系统来实施指挥的。
飞行控制系统主要由测试仪表(陀螺仪、加速度表等)、中间装置(电子计算机等)、执行机构(中磁阀门、电爆器材、姿态喷管、发动机伺服机构等)和电源配电装置(电池、二次电源、配电器等)组成。
其中,测量仪表好比是火箭的“眼睛”,它能随时监视运载火箭飞行路线是否对头,飞行姿态是否正确,并及时发出纠偏信号;中间装置则是火箭的“大脑”,它接到测量仪表发来的各种纠偏信号后,立即进行计算和综合处理,并将信号放大后传送给执行机构;执行机构接到中间装备传来的命令后,把电信号转变成一种相应的机械运动,准确地对火箭飞行路线或飞行姿态进行纠偏,使发动机能按时点火、关机和实现各级按时分离。所以执行机构好比是运载火箭的“手脚”。 火箭壳体及结构系统
火箭的壳体及其结构系统是安装有效载荷、飞行控制系统、动力装置等箭上设备,并将它们连成一个有机整体的框架系统。
壳体及结构系统不仅肩负着火箭在运输、发射和飞行过程中承受各种外力、保护箭内仪器设备不受损害的任务,而且还有流线型的光滑外壳,使火箭具有良好的空气动力外形和飞行性能。对一枚大型多级液体火箭而言,其箭体结构通常由有效载荷舱、整流罩仪器舱、氧化剂贮箱、燃料贮箱、级间段、发动机推力结构、尾舱和分离机构等组成。
载荷舱
有效载荷舱一般位于运载火箭的顶端,它是安放卫星、飞船等有效载荷的地方。整流罩是保护有效载荷的火箭外壳。在有效载荷与箭体分离前,整流罩将按照控制系统的命令在空中与卫星或飞船脱离。
仪器舱
仪器舱一般在有效载荷舱的下面,它是安装飞行控制系统主要仪器设备的专用舱段。
箭体结构
火箭箭体结构有多种形式,有单级箭体、多级箭体和捆绑式箭体之分。多级运载火箭各级之间的连接方式有串联、并联和串并联三种。串联式火箭是把数枚单级火箭头尾相接,连为一体。并联火箭又叫捆绑式火箭,它是把较大的一枚单级火箭放置中央,称为芯级,在其周围再捆绑若干枚助推火箭,或助推器,称之为助推级。串并联式火箭与并联式火箭的区别在于它的芯级不是一枚单级火箭,而是串联的多级火箭。
知识点
推进剂
推进剂又称推进药,能有规律地燃烧释放出能量,产生气体,推送火箭和导弹的运行。推进剂具有下列特性:
①比冲量高;
②密度大;
③燃烧产物的气体(或蒸气)分子量小,离解度小,无毒、无烟、无腐蚀性,不含凝聚态物质;
④火焰温度不高,以免烧蚀喷管;
⑤有较宽的温度适应范围;
⑥点火容易,燃烧稳定,燃速可调范围大;
⑦物理化学稳定性良好,能长期贮存;
⑧机械感度小,生产、加工、运输、使用中安全可靠;
⑨若为固体推进剂,还应有良好的力学性质,有较大的抗拉强度和延伸率。常用的推进剂主要有固体、液体两种,少量固液混合体也在试用。
什么可以作为运载体
λ噬菌体的衍生物是一种经过人工改造的λ噬菌体,可用于基因工程的载体。它是一种温和噬菌体,遗传物质是DNA,专门侵染大肠杆菌。因此,不可作为动物基因工程的载体。
例:T2噬菌体专门侵染大肠杆菌,会导致大肠杆菌裂解死亡。作为运载体,其中一个条件是,对受体细胞是安全的。很明显,T2噬菌体不满足这个条件。
运载体具备的特点
1、在宿主细胞中能保存下来并能大量复制,且对受体细胞无害,不影响受体细胞正常的生命活动。
2、有多个限制酶(Restriction enzymes)切点,而且每种酶的切点最好只有一个,如大肠杆菌pBR322就有多种限制酶的单一识别位点,可适于多种限制酶切割的DNA插入。
3、含有复制起始位点,能够独立复制;通过复制进行基因扩增,否则可能会使重组DNA丢失。
4、有一定的标记基因,便于进行筛选。如大肠杆菌的pBR322质粒携带氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因,就可以作为筛选的标记基因。一般来说,天然运载体往往不能满足上述要求,因此需要根据不同的目的和需要,对运载体进行人工改建。当前所使用的质粒载体几乎都是经过改建的。
5、载体DNA分子大小应合适,以便操作。
扩展资料
一个理想的载体至少应具备下列五个条件:
1、具有对受体细胞的可转移性或亲和性,以提高载体导入受体细胞的效率;
2、具有与特定受体细胞相适应的复制位点或整合位点,使得外源基因在受体细胞中稳定遗传;
3、具有较高的外源DNA的载装能力,以满足长片段的克隆;
4、具有多种单一的核酸内切酶识别切割位点,有利于外源基因的拼接插入;
5、具有合适的选择性标记,便于重组DNA分子的检测。
载体的可转移性和可复制性取决于它与受体细胞之间严格的亲缘关系,不同的受体细胞只能使用相匹配的载体系统
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